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    關于進口抗體試劑常見問題分析總結

    發(fā)布時間: 2015-07-10  點擊次數(shù): 1678次

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    一、問:用于免疫接種的抗原應如何制備呢?"

        答:抗原應溶解在緩沖溶液。不溶性抗原和可溶性的一樣好。理想的抗原濃度是1mg/ml,然而較低濃度也可以接受的。您也可以把含有目標蛋白的SDS-PAGE膠發(fā)給我們,將膠放于水中變脫色,因為醋酸能使得蛋白質進一步地變性。

        對此,還要注意避免:對動物有毒的添加劑??山邮埽旱土康腟DS、咪唑、尿素、胍,非離子型去污劑,EDTA或EGTA和聚丙烯酰胺。添加的zui終的量在很大程度上取決于樣本體積/抗原濃度。

        齊老師繼續(xù)問道:“選擇哪個物種用于免疫接種?"

        使用IgG和IgY抗體針對同一抗原的優(yōu)勢:①獨立確認預期的目標蛋白質被檢測。②抗體庫具有不同的特性,在不同的技術中能起到互補的作用雙重染色。③一般從遺傳角度上選擇與抗原有較遠的親源關系的物種用于免疫接種。

    二、問:在兔子中生產的抗體比那些在雞中生產的更好嗎?

        答:生產抗體的過程是抗原,特異動物免疫反應和測試的結合。如哺乳動物的保守靶標蛋白,我們推薦使用在雞中生產的抗體。因為他們在進化上親緣關系更遠,進口抗體試劑且他們的免疫系統(tǒng)與保守的哺乳動物蛋白反應更好,而這些保守哺乳動物蛋白可能不會被山羊或兔子的免疫系統(tǒng)識別。

    三、問:如何儲存抗體?

        答:血清中的抗體,對于抗體這是一個非常穩(wěn)定的存儲形式。在-20℃或-70℃的血清通??梢员4娑嗄辍T谝恍┨厥獾那闆r下,anti-peptide抗體儲存的時間更短。短時間可以儲存在4℃。在某些情況下操作要更加小心,*步在-20℃冷凍,之后放于-70℃冷凍的效果更好。 

        

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